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分光光度计的应用、组成和原理

时间:2015-11-10 11:01:45      阅读:10134

分光光度计是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器,它是现代实验室内检测用的常规仪器。

一、分光光度计的应用

分光光度计常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。

在印染方面,可以用分光光度计测量染色时燃料的上染百分率,以及整理在织的衣物上助剂的浓度,还可以用于颜色的测量。

同时它还广泛的应用于食品检测、农药的检测以及工业上石油的检测等。  

二、分光光度计的组成  

各种型号的可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个部分组成的,即光源、单色器、洗手池、检测器以及信号指示系统。

三、分光光度计的基本原理  

基于物质对不同波长的光的选择性吸收,不同的物质都有各自的吸收光谱,当光经色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光就会被溶液吸收。根据朗伯-比尔定律,当一束平行单色光照射到一定浓度的均匀溶液时,光强的减小程度和入射光的强度,溶液的浓度以及所透过溶液的长度成正比,其公式为:

T=I/I0 A=LogI0/I=Kbc  

其中:T:透色比 I0:入射光强 A:吸光度 I:头色光强度 K:吸收系数,1/mol/com b:液层厚,cm C:溶液的浓度,mol/l  

光的吸收定律不仅适用于有色溶液,也适用于无色溶液及气体和固体的非散射均匀体系,不仅适用于可见光的单色光,也适用于紫外和红外光区的单色光,但应注意,此定律仅适用于单色光和一定范围的低浓度溶液。溶液浓度过大时,透光性质发生变化,从容使溶液对光的吸收度与溶液浓度不成正比关系,波长交宽的混合光影响光的互补吸收,也会使测定产生误差。


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