液相色谱检测中,柱压是非常重要的一个仪器参数,需要时刻关注柱压情况,当柱压偏高时是哪些原因造成的呢,怎么解决呢?
1、色谱柱保存不当
色谱柱如较长时间不用,重新启用后需按说明书的活化方法重新活化后再使用,否则会出现柱压升高,柱效下降。
除另有规定外,一般反相色谱柱都需保存在高比例有机相中,以防止微生物滋生。否则重新启用时,会因微生物滋生而导致柱压异常升高,这种情况可以尝试用乙腈-水-TFA=50-50-0.1低流速过夜冲洗色谱柱。
2、样品污染
待检测样品成分复杂,部分成分死吸附在柱头端,导致柱压升高,柱效下降。这种情况下建议采用小孔径的滤头或滤膜(如0.22μm)进行过滤后再进样,以尽量减少污染物进入色谱柱。
中药项目往往样品会比较脏,使用一定时间后,会因柱头污染导致色谱柱性能下降,这种情况下可将色谱柱反接并按说明书的冲洗方法进行冲洗。
也可以加保护柱,保护柱为一种牺牲式拦截污染,有一定的使用寿命。做的过程中关注柱压,如柱压升高10%,则需更换保护柱芯。有些柱温箱无法放入保护柱,则可尝试将保护柱接在柱前,进样品后,但这种情况需对比不加保护柱的分析图谱,确定没有因保护柱与检测色谱柱的柱温差异而产生色谱图差异的情况下,才可以使用。
还要注意定期维护色谱柱,对于确认是样品污染导致色谱柱使用一段时间柱效下降的,建议对该项目使用的色谱柱反接后按说明书的异常再生方法进行定期维护,这种处理的好处是能减少柱子污染物聚集,延长色谱柱使用寿命。
检测蛋白类样品,容易因蛋白聚集导致柱压升高,柱效下降,这种情况可以用乙腈-水-TFA=50-50-0.1低流速过夜冲洗色谱柱。
(内容参考仪器信息网)