一、色谱柱的平衡

反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇（或乙腈）/水中的。请一定确保您所使用的流动相和醇（或乙腈）/水互溶，由于色谱柱在运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用分10-20倍的体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。

如果您所使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用含水量很高（约95%）的流动相过渡 ，样品分析完后， 冲洗柱子是亦然。 过去传统的方法使用纯水冲洗，对于非极性柱， 如C8或 C18 ，由于纯水不能浸润填料表面而冲倒碳链，造成柱效下降。

另外，分析样品时，由于纯水在填料表面不能浸润形成水膜，出现样品不保留而分不开，重现性差，所以对于一般的 C18或 C8，有机溶剂不能低于5%。硅胶柱或极性色谱柱在

经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水或甲醇或乙腈的流动相，

请在使用流动相之前用乙醇或异丙醇平衡。

那么如何平衡色谱柱？

平衡过程中，将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或

离子对试剂浓度如果较低，则需要较长的时间平衡） 。

二、色谱柱的再生

建议用来冲洗的溶剂体积

请根据下述选择您的再生方法：

极性固定相(如 Si，NH2，Diol 色谱填料)的再生：正庚烷—氯仿—乙酸乙酯—丙酮—乙醇—

水

非极性固定相（如反向填料 C18，C8等）的再生：水—乙腈—氯仿（或异丙醇）—乙腈—水