色谱是一种分离分析手段，分离是核心，因此担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类，液相色谱通常均采用填充柱。本文主要介绍液相色谱柱使用注意事项。

1、色谱柱由高压匀浆法装填，能承受较高压力。为获得最佳分离效果，使用时请不要超过200kgf，而且避免压力突然上升或变化，否则会造成硅胶填料的破坏，减少色谱柱的使用寿命。柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。

2、注意温度，除特殊要求外最高操作温度不要超过60℃。

3、如果流动相含有酸或无机盐，应当先用去离子水(20倍柱体积)冲洗干净，然后用100%乙腈或甲醇保存色谱柱，最后用柱子的接头密封，防止溶剂挥发干燥，并放在稳定的环境中存放。

4、绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

5、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落，避免造成色谱柱性能的降低。

6、应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。

7、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质，否则反冲会迅速降低柱效。

8、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱，保护柱一般是填有相似固定相的短柱，保护柱应该经常更换。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前装一根与分析柱相同固定相的短柱（5～30mm），可以起到保护、延长柱寿命的作用。虽然采用保护柱会损失一定的柱效但这是值得的。

9、经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50~75ml。

10、通常色谱柱寿命在正确使用时可达2年以上，以硅胶为基质的填料，只能在pH=2～9范围内使用。柱子使用一段时间后，可能有一些吸附作用强的物质保留于柱顶，特别是一些有色物质更易看清被吸着在柱顶的填料上。每次工作完后，最好用洗脱能力强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。当采用盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。含卤族元素（氟、氯、溴）的化合物可能会腐蚀不锈钢管道，不宜长期与之接触

11、新的色谱柱在使用一段时间后柱顶填料可能塌陷，使柱效下降，这时也可补加填料使柱效恢复。

12、装在高效液相色谱仪上柱子如不经常使用，应每隔4～5天开机冲洗15分钟。