荧光分析法能提供包含激发光谱、发射光谱、发光强度、发光寿命、荧光偏振等信息，是痕量分析领域一种重要的分析方法。本文以棱光F95S荧光分光光度计为例，说明荧光分光光度计测定液体样品荧光值和绘制荧光光谱曲线的具体步骤。

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一、测定液体状样品的荧光值

1、按下仪器总电源开关。

2、主机预热 30 分钟。

3、旋转波长调节旋钮至所需波长。

4、按“模式”选择键，进入主菜单界面，选择执行荧光值测定功能。

5、准备样品：荧光样品池一盛蒸馏水或去离子水作参比（或试剂空白、参比溶液），荧光样品池二盛所需测定样品溶液，分别用试镜纸将四壁擦拭干净。

6、灵敏度设定：打开样品室盖，样品池二置入样品座上，合上样品室盖。然后按“归一”调整键调节至LCD 液晶显示窗显示荧光值显示在 10-100 左右之间，记下此时的灵敏度档位。

7、调零：打开样品室盖，样品池一置入样品座上，合上样品室盖。然后按“调零”调整键，仪器自动调整0%，至LCD 液晶显示窗显示 0.0±0.1%止。如发现 0%有漂移，继续按下调零调整键，直至LCD液晶显示窗显示 0.0±0.1%为止。

8、放入待测样品：打开样品室盖，取出样品池一，然后把样品池二放入样品池座，合上样品室盖。

9、读数：等数值稳定下来之后显示的数值就是该待测样品的荧光值，由 LCD 液晶显示窗读出仪器测得的样品荧光值，并记录。

10、继续测定其它样品，或关闭仪器总电源开关。

二、绘制液体状样品的荧光光谱曲线

1、按下仪器总电源开关。

2、主机预热 30 分钟。

3、旋转波长调节旋钮至所需波长。

4、按“模式”选择键，进入主菜单界面，选择执行荧光值测定功能。

5、准备样品：荧光样品池一盛蒸馏水或去离子水作参比（或试剂空白、参比溶液），荧光样品池二盛所需测定样品溶液，分别用试镜纸将四壁擦试干净。

6、灵敏度设定：打开样品室盖，样品池二置入样品座上，合上样品室盖。然后按“归一”调整键，调节至LCD液晶显示窗显示荧光值显示在 10-100 左右之间，记下此时的灵敏度档位。

7、调零：打开样品室盖，样品池一置入样品座上，合上样品室盖。然后按“调零”调整键，仪器自动调整 0%，至LCD液晶显示窗显示 0.0±0.1%止。如发现 0%有漂移，继续按下调零调整键，直至LCD液晶显示窗显示 0.0±0.1%为止。

8、放入待测样品并读数：打开样品室盖，取出样品池一，然后把样品池二放入样品池座，合上样品室盖。等数值稳定下来之后显示的数值就是该待测样品的荧光值，由 LCD 液晶显示窗读出仪器测得的样品荧光值，并记录。

9、在要求测量的波长范围内按所需间隔逐点重复执行上述（7）-（8）步骤，记录每个波长点及其相应的荧光值。

10、作图：取一座标纸，X 轴为波长，Y 轴为荧光值，在要求测量的波长范围内将每一组数据标记在座标纸上，用曲线尺光滑地连接各数据点即可得到待测样品溶液的荧光光谱曲线图谱。

11、继续测定其它样品，或关闭仪器总电源开关。

（内容来源上海棱光网）